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Méthodes pour déterminer l'ovulation chez la chienne |
1) Frottis vaginal ou colpocytologie
Votre vétérinaire ou autre professionnel de la reproduction peut effectuer un frottis vaginal dès que la date prévue approche.
Dès qu’il marque le début de l’oestrus, on débute le dosage de la progestérone.
La méthode de coloration des cellules de l'éphitélium vaginal est une méthode très facile à réaliser en élevage canin.
Étapes effectuées pour faire un Frottis vaginal ou colpocytologie
- Le prélèvement de cellules épithéliales est réalisé au fond du vagin à l'aide d'un écouvillon qui est introduit verticalement, puis horizontalement avec une bascule de 90°, afin de respecter l'anatomie du vagin.
- L'étalement du prélèvement est réalisé par des passages en rotation sur une lame d'examen.
- On doit fixer ensuite le frottis sur la lame à l'aide d'un spray cytofixateur.
- On commence ensuite le protocole de coloration en respectant les temps de trempage.
- L'observation du frotis vaginal peut alors être réalisée à l'aide d'un microscope muni d'un oculaire normal ou disposant d'une caméra numérique connectée sur la prise USB d'un ordinateur.
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On effectue un frottis tous les 3 jours tant que progestéronémie < 3 – 5 ng/ml (8,0 nmol/l).
Puis plus on se rapproche du jour J, plus l'intervalle
entre 2 frottis diminue: tous les 2 jours si progestéronémie entre 4 et 10 ng/ml (8 – 25 nmol/l)
A partir de 10 ng/ml (25-30 nmol/l) Nous savons que la saillie (ou insémination artificielle) doit avoir lieu dans les 24 – 48 heures
Il est conseiller de renouveler la saillie (ou insémination artificielle) 48 heures après la première
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Interprétation des frottis( ce que l'on voit au microscope)
- Anœstrus : épithélium pluristratifié, cellules parabasales (rondes avec un noyau bien visible, non kératinisées)
- Début de proœstrus : augmentation de l'épaisseur de l'épithélium (cellules parabasales de taille augmentée), présence de cellules intermédiaires (plus anguleuses, noyau visible et début de kératinisation) et de quelques hématies
- Fin de proœstrus : apparition des cellules superficielles kératinisées (grandes, très anguleuses, sans noyau, kératinisées)
- Œstrus : essentiellement des cellules superficielles kératinisées + présence de cellules parabasales et intermédiaires
- Début de metœstrus : présence de cellules parabasales et de polynucléaires en petit nombre Þ la période de fécondation est dépassée
5 variables à bien vérifier pour bien interpréter un frottis vaginal :
- Le type de cellules sanguines : leucocytes (blanches) et/ou hématies (colorées en rouge ou bleu)
- La forme et la taille des cellules
- La présence ou absence de noyau dans les cellules
- La taille du noyau
- La couleur après coloration (cellules acidophiles ou basophiles)
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